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84農業網 時間:2018-03-15 作者:佚名 來源:網絡整理
三、傳染病診斷
家兔傳染病是兔病中最重要而給養兔業帶來損失最大的疫病,必須盡可能早期診斷,為預防治療提供依據,在非疫區作好預防為主的工作,在疫區做到“早、快、嚴、小”盡可能減少家兔死亡,降低損失,達到消滅傳染病的目的。
為了正確診斷,必須采取各種檢查疫病的方法,如流行病學、臨床、微生物學及免疫學等診斷方法,也可根據傳染病不同特點,采用上述某些方法或綜合應用各種方法。
流行病學診斷:通過訪問、調查,搜集有關資料進行分析研究,幫助傳染病的確診,可從以下幾方面進行:
1?發病家兔地區有哪些傳染病,最早發病時間、地點、季節,傳播速度及蔓延情況,發病兔年齡、性別,品種及其感染率、發病率和死亡率。
2?應從家兔飼養管理,飼料配方調制方法及衛生條件及臨近地區無有疫情發生。
3?傳染病發生經過、發病前預防注射過哪些疫(菌)苗以及發病后治療情況。
臨床癥狀,剖解所見的病理變化及經過治療的效果。
發病區域的地形、氣候、昆蟲及野生動物等與疫病發生的關系。
臨床診斷:是診斷疫病的最基本方法,通過對疫病發生的了解,實地觀察及對病、死兔剖檢和測溫等方法進行一般檢查,另外要對疫病進行類癥鑒別及療效驗證均十分重要。
病理解剖學診斷:每一種傳染病均會有其特殊病痕,很多疾病通過尸體剖解可以了解體內各種器官的病理形態學的變化,如兔病毒性出血癥(兔瘟)有肺出血等變化,巴氏桿菌病也有肺出血,所以要進行區別診斷。
微生物學診斷:這是查清病原體的重要手段。
1?細菌性疾病采取有病變的內臟器官,如心臟、肝、脾、腎、空腸、回腸、淋巴結等作為被檢病料。
染色與鏡檢:取清潔玻片作被檢病料的觸片或涂片,自然干燥后,火焰固定,用革蘭氏、美藍或姬姆薩染液染色,待干后鏡檢。由于不同致病菌染色結果不一樣,如A型魏氏梭菌呈革蘭氏陽性大桿菌,較少能看到芽胞;巴氏桿菌呈革蘭氏陰性菌,大小一致的卵圓形小桿菌。
分離培養:用不同的培養基如綿羊鮮血瓊脂、血清瓊脂等培養基,于37℃溫箱培養20-24小時,再取其典型菌落接種馬丁肉湯培養基,培養20-24小時,再作涂片檢查及測生化反應,動物接種和血清學檢驗等。
動物接種:可以取被子檢兔的臟器磨細用滅菌生理鹽水作1:5或1:10稀釋,也可以用分離培養菌落接種的馬丁肉湯作為接種材料。一般以皮下、肌肉、腹腔、靜脈或滴鼻接種家兔或小白鼠,劑量:兔0.5毫升為宜,小白鼠0.2毫升即可。若接種后兔或小白鼠發病或死亡,有典型的病理變化即可確診。
血清學檢驗:其目的在于應用血清學方法對兔群進行普查診斷。方法有試管法和玻片法。試管法:將待檢血清作成不同稀釋度,分別加入等量診斷抗原,搖勻后放置于37℃溫箱或室溫2-3小時觀察,凝集價在1:40以上者為陽性反應。玻片法:取被鹼血清0.1毫升加于玻片上,同時加入等量診斷抗原,于15-20℃下搖動玻片使抗原與被檢血清均勻混合,1-3分鐘內觀察絮狀物,液體透明者為陽性。
2?病毒性疾病由于各種病毒在不同組織中含毒量不同,所以必須要采取含病毒量最多的組織,并要求新鮮,如兔病毒性出血癥含毒量最多者是肝組織,水皰性口炎應采水皰液、水皰皮為被檢材料。
病毒的分離培養:用被檢材料接種于新鮮瓊脂培養基或血清血紅素培養基,結果均為陰性者則將被檢材料磨細或將液體材料用無菌生理鹽水(PH7.2左右)、磷酸鹽緩沖液作1:10稀釋用6號玻璃濾器過濾的濾液即可作為接種材料,同時在接種液中加入青、鏈霉素(每毫升1000單位)。
接種:根據接種材料可以分為下面三種方式:
雞胚接種:取9-10日齡的雞胚,每胚絨尿腔接種0.2毫升,一般在接種后48-72小時內死亡。
組織細胞接種:用各種動物組織的原代細胞或傳代細胞接種,病毒能在細胞上繁殖,同時能使細胞產生病變。
動物接種:通常用小白鼠、豚鼠和家兔接種病料。有的接種家兔一般皮下、肌肉或腹腔注射0.5毫升,有的用豚鼠皮內接種,如水皰性口炎。
(3)病毒的鑒定:分離得到的病毒材料要以電子顯微鏡檢查、血清學試驗即可確認,進一步還需做理化和生物學特性鑒定。
(4)血清中和試驗:在被檢病料上清液中加入等量該病標準高免血清,混勻后于37℃溫箱作用30分鐘;對照組用生理鹽水代替血清。兩組材料分別接種易感動物,一般觀察7天。如果血清組獲保護,而對照組發病死亡即可確診。
(5)兔疫學診斷:是一種重要的診斷技術,這些方法具有靈敏、快速、簡易、準確的特點,用于傳染病的診斷,大大地提高了診斷水平,至今應用已十分廣泛。
在動物傳染病的免疫學檢驗中,除凝集反應、沉淀反應、補體結合反應;中和反應等血清學檢驗方法外,先后又研究出兔疫擴散、變態反應、螢光抗體技術、酶標記技術、單克隆抗體技術等屬于免疫學診斷的范疇。
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