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84農業網 時間:2018-03-15 作者:佚名 來源:網絡整理
兔腸很長,其長度為體長的10倍左右,在醫藥工業上,可用兔腸作為提取肝素的原料。
1.原料要求
肝素廣泛分布于動物腸粘膜、肺、肝、血液中,在體內以蛋白質復合物的形式存在,取健康兔的新鮮腸粘膜為提取原料。
2.提取方法
肝素提取方法,一般采用鹽解―>離子交換工藝或酶解―>離子交換工藝,包括肝素蛋白質復合物的提取、分解和分離等三步,現以鹽解―>離子交換工藝為例,介紹提取工藝流程:
(1)提取
取新鮮腸粘膜投入反應鍋內,按原料重3%加入氯化鈉,用氫氧化鈉調節氫離子濃度至1納摩/升(pH9),逐步升溫至50~55℃,保溫2小時,繼續升溫至95℃,持溫10分鐘,隨即冷卻。
(2)吸附
將上述提取液用30目雙層紗布過濾,待冷卻至50℃以下即加入714型強堿性CI-型樹酯,樹酯用量為提取液的2%,攪拌8小時后靜置過夜。
(3)洗滌
虹吸除去上層液,收集樹酯,用水沖洗至澄清、濾干。用2倍量1.4摩爾的氯化鈉攪拌2小時,濾干。樹酯再用1倍量1.4摩爾的氯化鈉攪拌,濾干。
(4)洗脫
樹酯再用2倍量3摩爾的氯化鈉攪拌、洗脫8小時,濾干;再用1倍量3摩爾的氯化鈉攪拌、洗脫2小時,濾干。
(5)沉淀
合并濾液,加入等量95%的乙醇,沉淀過夜,虹吸除去上清液,收集沉淀物,用丙酮脫水干燥,即得粗品。
(6)精制
將粗品溶于15倍量的1%氯化鈉中,加6摩爾鹽酸調節氫離子濃度至31.63毫摩/升(pH1.5),過濾至清。隨即用5摩爾氫氧化鈉調節氫離子濃度至0.01納摩/升(pH11),按3%加入30%過氧化氫,25℃放置,24小時后再按1%加入過氧化氫,調節氫離子濃度至0.01納摩/升(pH11),靜置48小時,過濾,用6摩爾鹽酸調節氫離子濃度至316.3納摩/升(pH6.5),加入等量的95%乙醇沉淀。24小時后虹吸除去上清液,用丙酮脫水干燥,即得肝素鈉精品。
3.成品性質與規格
肝素為白色粉末,易溶于水,不溶于乙醇、丙酮等有機溶劑。常用制品為注射劑。為延緩作用,提高效果,目前生產長效肝素注射液;一般封裝于粉末安瓿中,臨用前以注射用水溶解后供肌肉注射。
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