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84農業網 時間:2018-03-14 作者:佚名 來源:網絡整理
本試驗抓住仔豬出生、斷奶、轉群等幾個關鍵時期應用復合生物菌的情況,研究其對仔豬腸道正常菌群、防治腸道疾病、對致病性大腸桿菌拮抗作用等的影響。
1材料與方法
1.1試驗材料
1.1.1試驗用制劑
復合生物菌:由公主嶺生物研究所提供。
治菌磺:由吉林省華牧動物保健品公司提供。
鹽酸金霉素:由福州抗生素廠生產,20萬/g。
1.1.2試驗動物
本次試驗挑選8頭英白母豬,生產性能基本相似,分娩日期相同或接近,經產胎次為2~4胎,窩產仔數在10~12頭之間。母豬分娩后,按每窩實產仔豬數分為2組,窩間不混群,初生體重基本相同。
1.2飼養管理
飼養程序和防疫程序均按常規進行,仔豬28d斷奶。
1.3試驗設計
1.3.1試驗分組
試驗分成試驗組和對照組。試驗組仔豬從出生后吃第1次初乳前,灌服復合生物液菌2mL,每日1次,至7日齡。1周后,用復合生物菌粒菌3%混入飼料中飼喂,至60日齡。對照組從補料開始在飼料中添加0.04%鹽酸金霉素,至60日齡。
1.3.2攻毒試驗
于仔豬10日齡時分別從試驗組和對照組選取5頭仔豬,分別灌服30mL致病性大腸桿菌,觀察仔豬糞便的變化及臨床反應,并測定腸道菌群的變化,同與添加鹽酸金霉素但未攻毒的對照組進行比較。
1.4試驗測試程序
1.4.1仔豬糞便情況記錄
從仔豬出生后開始全面記錄各窩仔豬的健康及下痢情況,主要有下痢仔豬的豬號、窩號、第一次下痢時間、處置方法、治愈情況、死亡數量及診斷結果。試驗期間,凡試驗組仔豬出現下痢,一律用復合生物菌按每日每次5mL劑量治療,對照組仔豬發病完全用治菌磺治療,劑量為0.2~0.3mL/kg,隔日一次,不混用。死亡剖檢診斷:對應用復合生物菌和抗生素治療無效而非其他原因導致死亡的仔豬,進行尸體剖檢,并由獸醫作出診斷。
1.4.2腸道菌群測定
以無菌操作采取直腸內10cm處糞便樣品,即用滅菌好的帶有塞子的玻璃管將棉拭送入直腸內10cm處,以棉拭將管塞頂掉,然后取糞樣或內容物,再將棉拭撤回管內,一同取出。取出后放入盛有CO2的無菌試管內,迅速帶回實驗室進行大腸桿菌、雙歧桿菌、乳酸桿菌的分離培養。采樣時間為2h,6h,12h及1d,2d,4d,7d,14d,28d,60d。在無菌室內采取樣品0.1g,以滅菌的稀釋液將樣品稀釋成10-2,10-3,10-4,10-5,10-6,10-7,用滅菌的滴管從高倍稀釋液開始分別取液一滴(0.01mL/滴),滴入各選擇培養基中,用曲玻棒推勻,每個稀釋度做3個重復,取其平均值。大腸桿菌為需氧和兼性厭氧菌,在37℃條件下培養24h;其它2種菌為厭氧菌,采用李伏夫氏法培養。
1.4.3抗病力測定
仔豬下痢致病性大腸桿菌:從豬場患病的仔豬糞便中分離出致病性大腸桿菌,采用普通肉湯培養基增菌,為10~12億個/mL。于仔豬10日齡時分別從試驗組和對照組各選5頭體重基本相同的健康仔豬,每頭灌服大腸桿菌肉湯培養物30mL,觀察仔豬糞便的變化及其它臨床反應,同時對直腸內大腸桿菌和雙歧桿菌進行測定。
2試驗結果與分析
3討論
3.1對仔豬腸道菌群的影響
本試驗仔豬一出生就開始口服復合生物菌,并跟蹤檢測直腸的主要正常菌群數,直腸內主要菌群大腸桿菌低于對照組,雙歧桿菌和乳酸桿菌高于對照組。而且,在仔豬出生3日齡后雙歧桿菌和乳酸桿菌始終占優勢。復合生物菌促進雙歧桿菌和乳酸桿菌在腸道內的繁殖,并有效抑制大腸桿菌的繁殖,對于仔豬腸道正常菌群的形成是非常有意義的,這與Gedek(1987),張國龍(1994)的研究結果是一致的。但直腸正常菌群沒有表現出提前定植的趨勢,因為正常情況下,仔豬出生后6h就可以在腸道內檢測到大腸桿菌、乳酸桿菌等。出生后24h主要正常菌群都可在直腸內檢出。
3.2對腸道疾病的防治效果
本試驗針對仔豬的常見病下痢(黃、白。⿷脧秃仙锞苿﹣硖娲股仡愃幬,取得了肯定的結果。對試驗期仔豬的記錄結果統計分析表明,在仔豬出生后的0~15日齡發病率高,在斷奶后一周內下痢、腹瀉也時有發生。使用復合生物菌防治仔豬黃、白痢取得了明顯的療效,且優于抗生素組。尤其是初生后立即灌服復合菌預防仔豬黃痢效果顯著。
3.3對致病性大腸桿菌的拮抗作用
在攻毒試驗中,試驗組表現出比對照組有明顯的抵抗力,給予致病性大腸桿菌后,對照組攻毒的5頭仔豬均表現出明顯的腹瀉癥狀,而試驗組卻沒有表現出腹瀉癥狀。這種外在的表現與腸道中微生態菌群的變化是一致的,試驗組攻毒后,正常菌群基本變化不大。但對照組攻毒后大腸桿菌數明顯高于試驗組,雙歧桿菌則明顯低于未攻毒的而又未服復合生物菌的對照組。
因此,復合生物菌本身對致病性大腸桿菌有拮抗作用,以至于致病性大腸桿菌表現不出致病作用。因此,復合生物菌有助于仔豬正常菌群的定植和優勢菌地位的鞏固,對仔豬腸道性疫病有明顯的抵抗作用。
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