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鹿血的鑒別方法

84農業網   時間:2018-03-15    作者:佚名    來源:網絡整理

依據法醫學血清學抗體沉淀反應的理論,使用抗鹿Hb(血紅蛋白)血清為抗體,快速準確地鑒別了鹿血干粉,為這種名貴中藥的原料質量控制提供了一種新型準確穩定的方法。

1、實驗與方法

1.1抗鹿Hb血清的制備

抗原:無菌操作下來鹿血液若干毫升,裝人加有適量抗凝劑的容器中,冰箱保存。取出以生理鹽水離心洗去血漿成分,取出若干毫升,加入滅菌冷蒸餾水洗制成20-40%的鹿血Hb溶液,除去基質后,加等量高滲鹽水,再加入等量不完全福氏佐劑乳化供免疫注射使用。免疫注射:用健康家兔為試驗對象。

以家兔大腿胭窩印肌肉背部皮下為注射本。間隔6日每次4-7ml,各注射一次,歷時18天,心臟穿刺取血初試滿意后,以免頸A吊線放血法全采血分離血清。效價及特異性測定:以事先準備好的鹿血HbV1/1000,1/2000,1/5000,1/10000,1/30Q0分別測定l-5號抗鹿Hb血清的效效價,結果各號抗鹿Hb血清效價均高于1/1000,、最高5號達到1/30000倍,并以其它豬、牛、羊動物血色素l/1000作沉淀試劑,結果均呈陰性反應,說明抗鹿Hb血清特異性良好。

1.2應用抗鹿Hb血清定性鑒別鹿血干粉鹿血干粉來源于遼寧遠東藥業集團,樣品標號l~5#,五個樣品外觀均為暗紫色干血粉。血樣提取及處理:取1~5#血樣各0.1g,分別裝入試管中,加人適量生理鹽水,充分攪拌,經數小時浸泡后,離心取血清液,測其濃度、以千倍稀釋液作如下試驗。沉淀試驗:把1~5#血樣1/1000稀釋液分別用毛細管壁緩緩注入預先裝有半量抗鹿Hb血清的微型沉淀管內,室溫下日光觀察,沉淀反應結果表明;血樣1,2,3,4,5#微型沉淀管內二液交界面上,15分鐘后出現白色沉淀環,此為抗鹿陽性反應。血樣3#,經60分鐘呈抗陰性反應,后經抗豬Hb血清測定,鑒定為豬血。即1,2,4,5#血樣為鹿血。

2、結果與討論

本文應用不完全佐劑加抗原做家兔胭部肌肉及背部皮下注射六日間隔三次,僅十八天便制成了高效價特異性良好的抗鹿Hb血清,該免疫方法快速準確。應用抗腐血清Hb可方便準確地鑒定鹿血干粉的真偽,為這種名貴中藥材的鑒別及藥材收購的質量控制提供了一個良好的鑒定方法,與此同時,也可為其他動物制品的種屬鑒別提供一個可靠的經驗。

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