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蜜蜂人工授精技術

84農業網   時間:2018-03-15    作者:佚名    來源:網絡整理

蜜蜂人工授精技術在1927年取得成功,中國開展該項技術的研究始于1959年,20世紀80年代后,已達到國際先進水平,利用該技術取得了單雄授精、單雄多雌授精和自體授精的新突破。作者用聚乙烯授精針頭,使人工授精操作更加直觀、高效和安全,并且把在實驗室操作的實驗技術,實現了轉地蜂場在野外進行授精的重大突破,選育出喀(阡)黑環系、白山五號、松丹?、?號和蜜漿雙高產的黃環系等優質蜂王品種(系)。當前,蜜蜂的人工授精技術,在原種保純、雜交制種乃至工程育種中起到了不可替代的作用。

一、設備和生理液

1、儀器設備 人工授精儀組合、生物實體顯微鏡、二氧化碳鋼瓶、膠管、洗氣瓶、測微尺、血細胞記數板、雄蜂飛翔籠以及常規生化實驗儀器設備。

2、生理液制備 生理液主要用于稀釋、保護精液和沖洗器具。生理液有效成分的濃度、溶液的ph等均可影響精子的活力和授精效果。因此,生理液的配制要求十分嚴格。目前,較為常用的生理液主要有:

(1)基輔生理液(paufler,1974):α-羥基檸檬酸三鈉2.43克;碳酸氫鈉0.21克;氯化鉀0.04克;磺胺0.30克;雙蒸水100毫升(ph8.4)。

(2)甘氨酸生理液:甘氨酸0.75克;氯化鈉0.58克;雙蒸水100毫升(ph8.6)。

(3)氯化鈉生理液:氯化鈉3.5克;抗生素(如硫酸鏈霉素)少許(約1.0克);雙蒸水400毫升(ph7.0~7.3)。

二、授精的環境

蜜蜂人工授精工作,無菌操作至關重要。由于操作消毒不徹底,蜂王可能染病死亡或傳病給子代。在授精過程中,直接病原就是蜂王和雄蜂體表以及人的皮膚。因此,在進行人工授精過程中嚴格要求無菌操作是十分必要的,要求:窗明幾凈,地面清潔無浮塵,采精前2小時,用5%來蘇兒噴灑地面;臺面用75%酒精擦拭;空間用紫外線燈照射;小型器皿、刀、剪、鉤、針用煮沸鍋消毒至少30分鐘;塑料針頭和有機制品,用配有抗生素的消毒液、雙蒸水、生理液依次沖洗,所有已消毒的器物,均須妥善放置,謹防二次污染。所有用作滅菌的酒精和消毒劑,不得與雄蜂、雄蜂精液和蜂王接觸。

蜜蜂人工授精操作環境,除了要求無菌操作外,適宜的溫度也是十分重要的。溫度太低,蜂王容易凍僵,雄蜂活動遲緩而不利排精,給采精操作帶來困難。室溫在20℃~30℃,授精效果較為理想。

三、人工授精

1、精液采集

雄蜂選擇。 雄蜂出房12天后,即達性成熟,便可捕捉采精。性成熟雄蜂的捕捉方法,有利用顏色標記雄蜂日齡法、巢內直接選擇性成熟雄蜂法、巢門捕捉婚飛雄蜂法和捕捉幽閉飼養雄蜂法,但是無論哪種方法捕捉雄蜂,均要求所捕雄蜂種純、個大、健壯、活躍和性成熟。

強迫排精!∮米笫帜粗负褪持笍母姑孀阶⌒、腹部兩側,用右手拇指按壓雄蜂的腹部背板1節~3節處,然后三指配合,同時向腹部尾端施加壓力,強迫“陰莖”外翻并射精。注意用力適度,以保精液在“陰莖”頂端形成近球狀,以利采集且不易被污染。

精液采集!⌒鄯渚旱牟杉袃煞N方法:一是體視顯微鏡下,直接用進樣器逐只雄蜂采集精液;二是采用漂洗技術采集精液。目前,應用較普遍的方法是第一種,該法應用簡便快捷,隨采隨用,精子活力強,污染機會少,授精效果理想。其方法為:先將針頭吸入少許生理液和氣泡,然后,右手操縱進樣器,使針頭與精液接觸,后稍微拉開點距離,但二者并不斷開,這樣就能借助于精液本身的粘滯性,把覆蓋在白色粘液上的土黃色精液較完全地抽吸進針頭,然后繼續采集其它雄蜂的精液,但要注意:每2只雄蜂的精液間,不應出現氣泡隔離;待針頭內貯滿所需精液量后,用生理液封閉針頭,以防精液干涸或污染;將針頭外側粘附雜物用浸過抗生素的棉簽擦去后,便可提升針頭的位置,準備給蜂王授精。

2、精液注射

處女王的選擇。 處女王的質量關系到人工授精的效果和新建蜂群的質量,要求人工授精處女王個體大、腹部碩長、無殘損、行動穩健、性成熟。

處女王麻醉!√幣跹b入麻醉室后,安裝到授精儀上,開啟二氧化碳鋼瓶閥門,調節至每分鐘從洗氣瓶冒出300個氣泡為宜,麻醉30秒左右,蜂王進入昏迷狀態,直到授精完畢,方可解除麻醉。

3、授精

打開螫針腔!》渫趼樽砗,調整顯微鏡,在鏡下移動背腹鉤操縱桿,使背腹鉤在探針配合下,分別鉤住背腹板頂端的中央位置,并向外側拉動背腹板,使其間距為3毫米~4毫米,然后再移動背鉤,使其“膨大”部分嵌入到螫針腔基部的三角縫內,再拉動背腹鉤,把背腹板間距拉至5毫米~6毫米。

進針注射!◇п樓淮蜷_后,調整蜂王和針頭的角度,排除針頭尖中的生理液和氣泡后,使針尖接近陰道口,用探針壓住瓣突,將針尖徐徐推入陰道直至中部輸卵管,取出探針,將精液慢慢注入。一次性授精通常注入8微升精液;兩次性授精,每次各注4微升~5微升精液,其間隔24小時~48小時。授精完畢,10秒~15秒后退出針頭,取出蜂王,點上標記,待其復蘇后,送回原核心群或框式王籠暫時貯存。

四、人工授精后的管理

蜂王人工授精后,需要細心管理,注意以下幾個方面:首先,蜂王授精后要及時放回原核心群(或大群),使其能得到工蜂飼喂,不致受餓而影響發育;其次,要保證授精王所在蜂群的蜂數,以便蜜蜂能自行調節巢溫;因為,溫度是制約精子轉移的重要因素;另外,還要預防蜂王出巢進行自然交尾,方法是將蜂王剪翅或幽閉巢門,防止蜂王外出,也可利用大型框式王籠封閉觀察其產卵情況。

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